MTT Assay 細胞增殖實驗試劑盒

MTT Assay Kit (Cell Proliferation)

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產品簡介

Abcam MTT Assay Kit (Cell Proliferation) 是一款操作簡便，可用於定量分析細胞增殖 (cell proliferation)、細胞存活率 (cell viability) 與細胞毒性 (cytotoxicity) 的比色法檢測套組，適用於懸浮細胞與貼附型細胞。套組內含 MTT Reagent 與 MTT Solvent 兩項主要試劑，可搭配微量盤分析儀 (microplate reader) 使用於 590 nm 波長測量吸光值，其呈色訊號強度與樣本中具代謝活性的活細胞數量成正比，整體反應時間約 3 小時 15 分鐘。

Functional Studies - MTT Assay Kit (Cell Proliferation) (AB211091) HeLa cells were grown in DMEM media supplemented with 10% FBS, harvested using trypsin and counted using Trypan blue and a hemocytometer. Cells were then serially diluted in a clear cell culture plate and incubated for 3 hours with MTT Reagent at 37°C. After incubation, cells were treated with MTT Solvent for 15 minutes at room temperature. Absorbance was measured at OD = 590 nm. Inset graph is an expanded segment of the assay data at lower cell number per well. — **Functional Studies - MTT Assay Kit (Cell Proliferation) (AB211091).** HeLa cells were grown in DMEM media supplemented with 10% FBS, harvested using trypsin and counted using Trypan blue and a hemocytometer. Cells were then serially diluted in a clear cell culture plate and incubated for 3 hours with MTT Reagent at 37°C. After incubation, cells were treated with MTT Solvent for 15 minutes at room temperature. Absorbance was measured at OD = 590 nm. Inset graph is an expanded segment of the assay data at lower cell number per well.

Biochemical assay - MTT Assay Kit (Cell Proliferation) (AB211091) Diagram showing the principles of the MTT assay method. — Diagram showing the principles of the MTT assay method.

主要特色

免用放射性物質，相較於傳統以放射性同位素標定的細胞增殖檢測方法，操作與廢棄物處理更為安全簡便。
比色法定量分析，呈色訊號強度與細胞代謝活性相關，在適當實驗條件下可反映具代謝活性的細胞數量。
適用樣本類型廣泛，涵蓋懸浮細胞與貼附型細胞，並已有大量研究文獻支持其應用於多種細胞類型。
操作流程標準化，整體反應時間約 3 小時 15 分鐘，適合高通量篩選實驗 (high-throughput screening)。

實驗注意事項

實驗開始前，確保所有 MTT 試劑均已回溫至室溫，避免使用冰冷的試劑進行實驗。
MTT assay 反映的是細胞的代謝活性，而非直接測量細胞數量；當藥物或其他處理條件影響細胞代謝活性時，MTT assay 結果可能與實際存活細胞數量產生差異。

科學背景

MTT 全名為 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide，是一種水溶性的四唑鹽 (tetrazolium salt) 化合物。其檢測原理是利用具代謝活性的活細胞，其粒線體內的脫氫酶 (dehydrogenase) 可將 MTT 還原為不溶於水的甲臢 (formazan) 結晶產物；細胞死亡或代謝活性降低時，MTT 還原能力通常會隨之下降，因此產生較低的呈色訊號。加入 MTT Solvent 後，可將形成的 formazan 結晶溶解，再以分光光度計或微量盤分析儀測量吸光值。吸光值可在適當實驗條件下反映樣本中的細胞代謝活性，並可用於間接評估細胞增殖或存活情形。由於 MTT assay 是以細胞代謝活性作為存活指標，因此廣泛應用於藥物篩選、細胞毒性測試、細胞增殖能力評估等研究領域，是目前最經典、文獻引用數量最多的細胞存活率檢測方法之一。

套組內容物

Item	Quantity	Storage temperature (before prep)	Storage temperature (after prep)
MTT Reagent	50 mL	-20°C	-20°C
MTT Solvent	150 mL	-20°C	-20°C

儲存條件

在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。

產品說明書

ab211091 MTT Assay Kit (Cell Proliferation)