EdU 細胞增殖試劑盒(綠色螢光)
EdU Cell Proliferation Image Kit (Green Fluorescence)
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產品簡介
EdU Cell Proliferation Image Kit (Green Fluorescence) (KTA2030) 提供了一種快速、高靈敏度且非放射性的分析方法，用於精準檢測細胞增殖情形。其偵測原理是利用 「EdU (5-ethynyl-2'-deoxyuridine)」，它是一種胸腺嘧啶核苷類似物 (thymidine analog)。在細胞增殖過程中，EdU 會在 S 期 (S-phase) DNA 複製時取代胸腺嘧啶 (thymidine) 摻入新合成的 DNA 分子中。隨後透過點擊化學 (click chemistry) 反應，利用銅催化疊氮-炔烴環加成反應 (copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition)，使帶有疊氮基 (azide) 的 AbFluor 488 螢光探針與 DNA 中的 EdU 炔烴基團 (alkyne group) 發生專一性共價結合。此反應過程極為高效，僅需 30 分鐘即可完成標定，使新合成的 DNA 標記上強烈且穩定的綠色螢光（Ex/Em = 501/525 nm）。
細胞增殖的檢測對於評估細胞健康、確定基因毒性或評估抗癌藥物至關重要。目前，直接測量 DNA 合成仍是最準確的方法，通常是在 DNA 複製過程中將核苷類似物（如 [3H] thymidine 或 BrdU (5-bromo-2'-deoxyuridine)）摻入細胞，然後分別透過放射自顯影或抗 BrdU 抗體進行檢測。EdU 是 BrdU 檢測的一種新型替代方法，相較於傳統 BrdU 檢測法，EdU 檢測法無需進行 DNA 變性 (DNA denaturation) 處理（通常使用 HCl 強酸、加熱或 DNase 消化），因此能更完整地保留細胞形態、DNA 結構與蛋白質抗原結合位點，不僅大幅簡化實驗流程，也縮短了檢測時間。本套組產生的螢光訊號可透過螢光顯微鏡進行觀察，且與多種螢光標記具有優異的兼容性，是細胞週期、發育生物學及抗癌藥物篩選研究中不可或缺的工具。
主要特色
- 提供最佳化的陰性對照，排除假陽性結果。
- 無需抗體。
- 無需變性步驟，維持細胞形態和 DNA 完整性。
- 比傳統方法更簡單、可靠且省時。
- 採用專有的 AbFluor 488 疊氮化物（激發/發射波長 = 501/525 nm），具有良好的光穩定性，並可最大程度地減少螢光淬滅 (fluorescence quenching)。
- 專為螢光顯微鏡偵測最佳化設計。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 100 T | 500 T | ||
| EdU (10 mM) 胸腺嘧啶核苷類似物 | 100 µL | 500 µL | -20℃ |
| BSA Wash Solution (5×) 牛血清白蛋白清洗液，用於降低背景雜訊 | 12 mL | 60 mL | -20℃ |
| AbFluor 488 azide 帶有綠色螢光標記的疊氮探針 | 20 µL | 100 µL | -20℃, protected from light |
| Reaction Buffer (10×) 點擊化學反應緩衝液 | 1 mL | 5 mL | 4℃ |
| Copper Reagent 催化反應所需的銅離子試劑 | 0.4 mL | 2 mL | 4℃ |
| Reducing Agent 還原劑，確保點擊化學反應高效進行 | 100 mg | 5×100 mg | -20℃ |
| Hoechst 33342 (1,000×) 藍色螢光染劑，用於標記細胞核 | 12 µL | 60 µL | -20℃, protected from light |
| Hydroxyurea DNA 合成抑制劑，用於實驗中的陰性對照組 (negative control) 設計 | 10 µL | 50 µL | 4℃, protected from light |
儲存條件
自出貨日起，在建議儲存條件下可穩定保存至少 12 個月。