CCK-8 細胞增殖和細胞毒性試劑盒
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
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產品簡介
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) (KTA1020) 提供了一種簡便、高靈敏度的比色分析方法，用於測定細胞增殖 (cell proliferation) 與細胞毒性 (cell cytotoxicity)。其偵測原理是藉由電子載體 1-Methoxy PMS 將細胞內粒線體脫氫酶 (mitochondrial dehydrogenase) 產生的電子傳遞至高度水溶性的四唑鹽 WST-8，使其還原為橙黃色甲臢染料 (formazan dye)。所生成的甲臢 (formazan) 數量與活細胞數量成正比。研究人員僅需將 CCK-8 溶液直接加入細胞樣品中孵育，隨後透過微量盤分析儀 (microplate reader) 在 450 nm 波長下測量吸光值，即可精準評估細胞存活率 (cell viability) 與增殖狀態，其偵測靈敏度優於 MTT、XTT、MTS 與 WST-1 等其他四唑鹽檢測方法。此外，由於 CCK-8 產生的甲臢產物具有高度水溶性，無需使用有機溶劑溶解結晶，使檢測流程更為簡便；且 CCK-8 對細胞無明顯毒性，檢測後的細胞仍可應用於其他後續分析實驗。
主要特色
- 高靈敏度： CCK-8 的檢測靈敏度高於其他四唑鹽檢測方法，例如 MTT、XTT、MTS 或 WST-1。
- 操作簡便（一步法）： 即用型溶液設計，無需配製，不需更換培養基或洗滌細胞，加入試劑孵育後即可直接讀值（ CCK-8 還原產物具高度水溶性且穩定安全，不需使用有機溶劑溶解）。
- 兼容性佳： CCK-8 對細胞幾乎無毒性，實驗結束後細胞仍可進行其他後續檢測。
- 高穩定性： 試劑性質穩定，可長期保存。
操作注意事項
由於 CCK-8 是基於活細胞中脫氫酶的活性檢測，因此能夠影響活細胞脫氫酶活性的條件或化學物質，均有可能導致實際活細胞數量與使用 CCK-8 測得的細胞數量產生差異。
- 務必確認 well 內沒有氣泡，否則會干擾數據準確性。
- 孵育時間取決於 well 內細胞的種類和數量。一般來說，白血球顯色較弱，因此可能需要較長的孵育時間（長達 4 小時）或較多的細胞（約 10⁵ 個細胞/孔）。
- 如果因長時間培養導致培養基的顏色或 pH 值發生變化，請在添加 CCK-8 時更換培養基。
- 由於 CCK-8 的毒性較低，相同的細胞可用於其他細胞檢測。
套組內容物
即用型 CCK-8 溶液（包裝：1000 tests 為 10 mL、10000 tests 為 100 mL）
儲存條件
於 0~5°C 避光儲存，可穩定保存一年。若需長期保存，可存放於 -20°C。應避免反覆凍融，因其會導致背景值升高，干擾檢測結果。若頻繁使用，建議保存在 0~5°C。