LinKine™ AbFluor™ 594 抗體標定試劑盒
LinKine™ AbFluor™ 594 Labeling Kit
廠牌
產品簡介
LinKine™ AbFluor™ 594 抗體標定試劑盒提供了一種簡便快速的方法，可將 AbFluor™ 594 螢光染料標定至抗體、蛋白質、胜肽 (peptide) 或其他含有游離胺基 (free amine groups) 的分子上，標定產物可適用於免疫偵測實驗。套組內含已活化的 AbFluor™ 594 溶液，可直接用於標定反應；套組亦附有純化管柱，標定完成後可直接進行純化，去除未反應的游離染料，減低背景干擾。使用本產品製備標定一級抗體，即可省去二級抗體使用步驟，不僅縮短實驗時程，也能避免因二抗非專一性結合所導致的高背景值問題，特別適合多重螢光染色實驗使用。
主要特色
- 套組內附已活化的 AbFluor™ 594 溶液，可直接與抗體或蛋白質上的游離胺基反應形成標定產物，無需自行活化染料。
- 套組內含純化管柱 (0.5 mL, 50 KD)，標定完成後可直接進行離心純化，快速去除未反應的游離染料，提高標定產物純度，避免免疫偵測反應背景值升高。
- AbFluor™ 594 激發光/放射光波長峰值約為 Ex/Em = 593/614 nm，屬深紅色螢光染料，可搭配常見流式細胞儀與螢光顯微鏡之對應濾光片組合使用。
- AbFluor™ 594 作為新一代替代性染料，其核心結構經過修飾設計，具備良好的光穩定性 (photostability)，與相近光譜的深紅色染料（如 Texas Red、DyLight® 594、Alexa Fluor® 594）相比，可產生更高亮度的標定產物，提供研究人員在深紅色螢光通道標定時的另一項選擇。
實驗注意事項
- 進行標定反應前，樣本初始濃度建議高於 2 mg/mL，理想濃度為 2.5 mg/mL 以上；若濃度不足，建議先進行濃縮處理。
- 樣本緩衝液 pH 值須介於 6.5–8.0 之間，可使用 MES、PBS 或 HEPES 等不含游離胺基的緩衝液；EDTA 等螯合劑不會影響，可正常使用；甘油 (glycerol) 濃度須低於 50%，BSA 濃度須低於 0.1%。緩衝液中不可含有 Glycine 及其他具游離胺基的成分，以免干擾標定反應。若樣本緩衝液含有可能干擾標定的成分，建議先以超過濾離心濃縮管或透析袋將緩衝液置換為 PBS，再進行後續標定步驟。更多樣本緩衝液細部條件說明，可參照下方表格或產品說明書。
- 本套組所附純化管柱適用於分子量 100–200 kDa 的樣本，若樣本分子量超出此範圍，建議選用其他規格的純化管柱。
- 標定完成的產物於 4°C 避光保存可穩定 1 個月以上；若需長期保存，建議以等體積甘油 (glycerol) 作為冷凍保護劑，分裝後存放於 -20°C 避光保存，並避免反覆凍融。
- 不同批號或不同廠牌的套組組件不建議混用，以免影響標定結果的穩定性。
| pH | 6.5-8.0 |
| Amine free buffer | MES, PBS, HEPES |
| Chelating agents (e. g. EDTA) | ✓ |
| Glycerol | < 50% |
| BSA | < 0.1% |
| Glycine | ✗ |
| Components containing amino | ✗ |
科學背景
AbFluor™ 系列螢光染料是一系列高水溶性的螢光染料家族，涵蓋從可見光到近紅外光 (NIR) 的螢光波長範圍，可用於標定蛋白質、核酸等多種生物分子。其中 AbFluor™ 594 屬於深紅色螢光染料，激發/放射波長峰值約為 593/614 nm，常用於流式細胞分析、免疫螢光染色及共軛焦顯微鏡影像等應用，適合與 AbFluor™ 488 或其他綠色螢光染料搭配進行多重螢光染色實驗，降低不同螢光通道間的訊號重疊。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 3×100 μg | 1 mg | ||
| Activated AbFluor™ 594 Solution | 7.5 µL | 25 µL | -20℃, protected from light |
| AbFluor™ 594 Labeling Solution | 15 μL | 50 μL | -20℃ |
| Purification Column (0.5 mL, 50 KD) | 3 | 2 | RT |
| Booklet | 1 | 1 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 6 個月。