EliKine™ 小鼠 IFN-γ ELISA 試劑盒
EliKine™ Mouse IFN-γ ELISA Kit
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產品簡介
EliKine™ 小鼠干擾素-γ (interferon-gamma, IFN-γ) ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的小鼠 IFN-γ 濃度。檢測時，將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 IFN-γ 專一性捕捉抗體。樣本中的 IFN-γ 與捕捉抗體結合後，再加入生物素 (Biotin) 標記之 IFN-γ 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入鏈黴親和素－辣根過氧化物酶複合物 (Streptavidin-HRP conjugate)，使 HRP 與生物素標記偵測抗體結合。再次沖洗後加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 IFN-γ 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 IFN-γ 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：31.25–2000 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：16 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體；透過生物素－鏈黴親和素系統 (Biotin-Streptavidin system) 連結 HRP 酵素標記物，加入酵素受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，並可透過標準曲線進行定量分析。
科學背景
干擾素-γ (interferon-gamma, IFN-γ) 是一種重要的免疫調節細胞激素 (cytokine)，主要由 T 細胞及自然殺手細胞 (natural killer cells, NK cells) 等免疫細胞產生，在宿主防禦及免疫反應中扮演重要角色。IFN-γ 可促進第一型輔助 T 細胞 (T helper 1 cells, Th1) 的分化與活化，並促進單核球 (monocytes) 及巨噬細胞 (macrophages) 的活化，同時提高主要組織相容性複合體 (major histocompatibility complex, MHC) 等抗原呈現相關分子的表現，進而增強細胞免疫反應。此外，IFN-γ 亦參與 B 細胞免疫球蛋白類別轉換 (immunoglobulin class switching)，並具有抗病毒、抑制細胞增殖及促進細胞凋亡等作用。IFN-γ 亦可抑制 Th17 細胞分化，參與不同 T 細胞亞群之間的免疫調節。IFN-γ 可透過由 IFN-γ 受體 1 (IFN-γ receptor 1, IFN-γ R1) 與 IFN-γ 受體 2 (IFN-γ receptor 2, IFN-γ R2) 組成的受體複合體傳遞訊號，進而調控多種免疫反應。IFN-γ 檢測廣泛應用於細胞免疫、Th1 免疫反應、免疫調節、抗感染及發炎反應相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Mouse IFN-γ Microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Mouse IFN-γ Standard (lyophilized) | 1 | 2 | 4℃ |
| Sample Diluent (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Assay Buffer (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Mouse IFN-γ Detect Antibody (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| Streptavidin-HRP (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| HRP Substrate (TMB) | 5 mL | 10 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 5 mL | 10 mL | 4℃ |
| Wash Buffer (20×) | 25 mL | 50 mL | 4℃ |
| Plate Covers | 1 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。