EliKine™ 人類 PD-1 ELISA 試劑盒
EliKine™ Human PD-1 ELISA Kit
廠牌
產品簡介
EliKine™ 人類程序性死亡蛋白-1 (programmed cell death protein 1, PD-1) ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的人類 PD-1 濃度。檢測時，先將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 PD-1 專一性捕捉抗體。接著加入帶有辣根過氧化物酶 (horseradish peroxidase, HRP) 標記之 PD-1 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 PD-1 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 PD-1 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：3.9–250 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：3.9 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體（偵測抗體通常帶有 HRP 酵素標記）。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體，加入 HRP 呈色受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，透過標準曲線即可定量分析樣本中的分析物濃度。
科學背景
程序性死亡蛋白-1 (programmed cell death protein 1, PD-1) 又稱 CD279，是一種屬於 B7-CD28 家族的 I 型跨膜蛋白 (type I transmembrane protein)，主要表現於活化的 CD4⁺ T 細胞、CD8⁺ T 細胞、B 細胞、自然殺手 T 細胞 (natural killer T cells, NKT cells)、單核球 (monocytes) 及樹突細胞 (dendritic cells) 等免疫細胞。PD-1 與其配體程序性死亡配體-1 (programmed death-ligand 1, PD-L1) 結合後，可透過免疫受體酪胺酸轉換基序 (immunoreceptor tyrosine-based switch motif, ITSM) 招募蛋白酪胺酸磷酸酶 SHP-2，進而抑制 T 細胞受體 (T cell receptor, TCR) 訊號傳遞，降低 CD4⁺ 及 CD8⁺ T 細胞的活化與增殖，對免疫反應產生負向調控作用。此外，PD-1 亦可表現於調節型 T 細胞 (regulatory T cells, Treg)，參與其功能調控。PD-1/PD-L1 訊號軸是免疫檢查點 (immune checkpoint) 調控的重要機制，與免疫耐受、慢性感染及腫瘤免疫等研究密切相關。PD-1 檢測廣泛應用於 T 細胞免疫調控、免疫檢查點及腫瘤免疫相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Human PD-1 Microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Human PD-1 Standard (lyophilized) | 1 | 2 | 4℃ |
| Sample Diluent (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Assay Buffer (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| HRP-conjugated Human PD-1 Detect Antibody (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| HRP Substrate (TMB) | 5 mL | 10 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 5 mL | 10 mL | 4℃ |
| Wash Buffer (20×) | 25 mL | 50 mL | 4℃ |
| Plate Covers | 1 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。