EliKine™ 人類 VEGF ELISA 試劑盒
EliKine™ Human VEGF ELISA Kit
廠牌
產品簡介
EliKine™ 人類血管內皮生長因子 (vascular endothelial growth factor, VEGF) ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的人類 VEGF 濃度。檢測時，將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 VEGF 專一性捕捉抗體。樣本中的 VEGF 與捕捉抗體結合後，再加入生物素 (Biotin) 標記之 VEGF 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入鏈黴親和素－辣根過氧化物酶複合物 (Streptavidin-HRP conjugate)，使 HRP 與生物素標記偵測抗體結合。再次沖洗後加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 VEGF 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 VEGF 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：31.25–2000 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：16 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體；透過生物素－鏈黴親和素系統 (Biotin-Streptavidin system) 連結 HRP 酵素標記物，加入酵素受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，並可透過標準曲線進行定量分析。
科學背景
血管內皮生長因子 (vascular endothelial growth factor, VEGF) 是一種重要的血管新生 (angiogenesis) 與血管生成 (vasculogenesis) 調控因子，參與胚胎發育及成人組織修復等多種生理過程。VEGF 可與血管內皮生長因子受體 1 (VEGF receptor 1, VEGFR1/Flt-1)、血管內皮生長因子受體 2 (VEGF receptor 2, VEGFR2/KDR) 及 Neuropilin-1 等受體結合，啟動下游訊號傳遞，調控血管內皮細胞的增殖、遷移與存活。此外，VEGF 亦參與傷口修復及女性生殖週期相關的血管生成。VEGF 可透過選擇性剪接 (alternative splicing) 及蛋白水解 (proteolysis) 產生多種異構型 (isoforms)，其表現量異常與腫瘤血管新生及血管通透性增加等病理過程相關。VEGF 檢測廣泛應用於血管新生、組織修復、腫瘤及血管功能相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Human VEGF Microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Human VEGF Standard (lyophilized) | 1 | 2 | 4℃ |
| Sample Diluent (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Assay Buffer (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Human VEGF Detect Antibody (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| Streptavidin-HRP (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| HRP Substrate (TMB) | 5 mL | 10 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 5 mL | 10 mL | 4℃ |
| Wash Buffer (20×) | 25 mL | 50 mL | 4℃ |
| Plate Covers | 1 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。