EliKine™ 人類 β-神經生長因子 ELISA 試劑盒
EliKine™ Human β-NGF ELISA Kit
廠牌
產品簡介
EliKine™ 人類 β-神經生長因子 (β-NGF) ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的人類 β-神經生長因子 (human β-nerve growth factor, β-NGF) 濃度。檢測時，將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 β-NGF 專一性捕捉抗體。樣本中的 β-NGF 與捕捉抗體結合後，再加入生物素 (Biotin) 標記之 β-NGF 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入鏈黴親和素－辣根過氧化物酶複合物 (Streptavidin-HRP conjugate)，使 HRP 與生物素標記偵測抗體結合。再次沖洗後加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 β-NGF 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 β-NGF 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：31.25–2000 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：16 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體；透過生物素－鏈黴親和素系統 (Biotin-Streptavidin system) 連結 HRP 酵素標記物，加入酵素受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，並可透過標準曲線進行定量分析。
科學背景
β-神經生長因子 (β-nerve growth factor, β-NGF) 是神經生長因子 (nerve growth factor, NGF) 家族的重要成員，屬於神經營養因子 (neurotrophic factors)，主要參與神經細胞的存活、生長、分化及功能維持。β-NGF 以分泌型蛋白形式存在，通常由兩個相同次單元形成同源二聚體 (homodimer)，並與其他蛋白形成具有生物活性的複合體。
β-NGF 可透過與神經生長因子受體，包括高親和力受體 TrkA (tropomyosin receptor kinase A, TrkA) 及低親和力受體 p75NTR (p75 neurotrophin receptor)，調控下游訊號傳遞，影響交感神經元 (sympathetic neurons) 及部分感覺神經元 (sensory neurons) 的發育與功能維持。此外，β-NGF 亦參與免疫調節與發炎反應，其表現異常與多種神經系統疾病及過敏相關疾病研究密切相關。
β-NGF 基因 (NGF gene) 的異常變異與遺傳性感覺與自律神經病變第 5 型 (hereditary sensory and autonomic neuropathy type 5, HSAN5) 有關，而 β-NGF 表現調控異常亦被發現與過敏性鼻炎 (allergic rhinitis) 等發炎相關疾病研究有所關聯。因此，β-NGF 濃度分析廣泛應用於神經科學、神經退化疾病、免疫調節及組織修復相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Human β-NGF Microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Human β-NGF Standard (lyophilized) | 1 | 2 | 4℃ |
| Sample Diluent (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Assay Buffer (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Human β-NGF Detect Antibody (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| Streptavidin-HRP (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| HRP Substrate (TMB) | 5 mL | 10 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 5 mL | 10 mL | 4℃ |
| Wash Buffer (20×) | 25 mL | 50 mL | 4℃ |
| Plate Covers | 1 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。