EliKine™ 人類 IL-12 p70 ELISA 試劑盒
EliKine™ Human IL-12 p70 ELISA Kit
廠牌
產品簡介
EliKine™ 人類白介素-12 p70 (interleukin-12 p70, IL-12 p70) ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的人類 IL-12 濃度。檢測時，將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 IL-12 專一性捕捉抗體。樣本中的 IL-12 與捕捉抗體結合後，再加入生物素 (Biotin) 標記之 IL-12 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入鏈黴親和素－辣根過氧化物酶複合物 (Streptavidin-HRP conjugate)，使 HRP 與生物素標記偵測抗體結合。再次沖洗後加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 IL-12 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 IL-12 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：7.8–500 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：4 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體；透過生物素－鏈黴親和素系統 (Biotin-Streptavidin system) 連結 HRP 酵素標記物，加入酵素受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，並可透過標準曲線進行定量分析。
科學背景
白介素-12 p70 (interleukin-12 p70, IL-12 p70) 是一種由樹突細胞 (dendritic cells)、巨噬細胞 (macrophages) 及 B 淋巴母細胞 (B-lymphoblastoid cells) 等免疫細胞在抗原刺激下產生的細胞激素 (cytokine)，參與先天免疫與後天免疫反應的調控。IL-12 p70 是由 IL-12α (p35) 與 IL-12β (p40) 兩個次單元組成的異源二聚體細胞激素 (heterodimeric cytokine)，分別由 IL12A 與 IL12B 基因編碼。IL-12 p70 可作用於 T 細胞及自然殺手細胞 (natural killer cells, NK cells)，促進第一型輔助 T 細胞 (T helper 1 cells, Th1) 分化及干擾素-γ (interferon-gamma, IFN-γ) 產生，進而參與細胞免疫及抗感染反應。IL-12 p70 檢測廣泛應用於 Th1 免疫反應機制、免疫調節、腫瘤免疫以及感染與自體免疫疾病相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Human IL-12 Microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Human IL-12 Standard (lyophilized) | 1 | 1 | 4℃ |
| Sample Diluent (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Assay Buffer (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Human IL-12 Detect Antibody (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| Streptavidin-HRP (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| HRP Substrate (TMB) | 5 mL | 10 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 5 mL | 10 mL | 4℃ |
| Wash Buffer (20×) | 25 mL | 50 mL | 4℃ |
| Plate Covers | 1 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。