EliKine™ 人類鹼性纖維母細胞生長因子 ELISA 試劑盒
EliKine™ Human bFGF ELISA Kit
廠牌
產品簡介
EliKine™ 人類鹼性纖維母細胞生長因子 (basic fibroblast growth factor, bFGF) ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的人類 bFGF 濃度。檢測時，將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 bFGF 專一性捕捉抗體。樣本中的 bFGF 與捕捉抗體結合後，再加入生物素 (Biotin) 標記之 bFGF 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入鏈黴親和素－辣根過氧化物酶複合物 (Streptavidin-HRP conjugate)，使 HRP 與生物素標記偵測抗體結合。再次沖洗後加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 bFGF 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 bFGF 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：15.63–1000 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：8 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體；透過生物素－鏈黴親和素系統 (Biotin-Streptavidin system) 連結 HRP 酵素標記物，加入酵素受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，並可透過標準曲線進行定量分析。
科學背景
鹼性纖維母細胞生長因子 (basic fibroblast growth factor, bFGF)，又稱纖維母細胞生長因子 2 (fibroblast growth factor 2, FGF2)，是纖維母細胞生長因子家族的重要成員之一。bFGF 蛋白具有促進細胞增殖、分化及組織修復的重要功能，並參與胚胎發育、神經系統形成、傷口癒合及血管新生 (angiogenesis) 等多種生理過程。
bFGF 可與細胞表面的 FGF 受體 (fibroblast growth factor receptors, FGFRs) 結合，並透過下游訊號傳遞路徑調控細胞增殖與存活。此外，FGF 家族蛋白具有與肝素 (heparin) 結合的特性，此交互作用可影響其穩定性、受體結合及生物活性。
FGF2 蛋白具有多種轉譯形式，包括由 AUG 與非典型 CUG 起始密碼子產生的不同異構型 (isoforms)。其中，較高分子量的 CUG 起始異構型主要定位於細胞核，參與細胞內調控作用 (intracrine signaling)；而 AUG 起始形式則主要存在於細胞質，並透過自分泌 (autocrine) 與旁分泌 (paracrine) 作用調節細胞間訊號傳遞。bFGF 濃度分析廣泛應用於細胞生物學、組織工程、血管新生及再生醫學相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Human bFGF Microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Human bFGF Standard (lyophilized) | 1 | 2 | 4℃ |
| Sample Diluent (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Assay Buffer (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Human bFGF Detect Antibody (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| Streptavidin-HRP (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| HRP Substrate (TMB) | 5 mL | 10 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 5 mL | 10 mL | 4℃ |
| Wash Buffer (20×) | 25 mL | 50 mL | 4℃ |
| Plate Covers | 1 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。