EliKine™ 人類可溶性細胞間黏附分子-1 ELISA 試劑盒
EliKine™ Human CD54 ELISA Kit
廠牌
產品簡介
EliKine™ 人類可溶性細胞間黏附分子-1 (soluble intercellular adhesion molecule-1, sICAM-1/CD54) ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的人類 sICAM-1 (CD54) 濃度。檢測時，先將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 sICAM-1 (CD54) 專一性捕捉抗體。接著加入帶有辣根過氧化物酶 (horseradish peroxidase, HRP) 標記之 sICAM-1 (CD54) 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 sICAM-1 (CD54) 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 sICAM-1 (CD54) 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：7.8–500 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：7.8 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體（偵測抗體通常帶有 HRP 酵素標記）。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體，加入 HRP 呈色受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，透過標準曲線即可定量分析樣本中的分析物濃度。
科學背景
細胞間黏附分子-1 (intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)，又稱 CD54，是由 ICAM1 基因編碼的細胞表面醣蛋白，屬於免疫球蛋白超家族 (immunoglobulin superfamily) 的成員。ICAM-1 主要表現於血管內皮細胞及多種免疫細胞表面。ICAM-1 是一種單次跨膜蛋白 (single-pass transmembrane protein)，由胞外區域、跨膜區域及細胞質尾端組成，其胞外區域具有多個免疫球蛋白樣結構域，並高度醣基化。受到發炎細胞激素等刺激時，細胞表面的 ICAM-1 表現增加，並參與白血球黏附、跨內皮移行及發炎反應。細胞表面的 ICAM-1 亦可經由蛋白水解等機制釋放形成可溶性 ICAM-1 (soluble ICAM-1, sICAM-1)，因此 sICAM-1 濃度可作為研究 ICAM-1 調控、細胞黏附及發炎反應的重要分析指標。sICAM-1 檢測已廣泛應用於免疫學、血管生物學、發炎反應及疾病機制相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Human CD54 Microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Human CD54 Standard (lyophilized) | 1 | 2 | 4℃ |
| Sample Diluent (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Assay Buffer (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| HRP-conjugated Human CD54 Detect Antibody (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| HRP Substrate (TMB) | 5 mL | 10 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 5 mL | 10 mL | 4℃ |
| Wash Buffer (20×) | 25 mL | 50 mL | 4℃ |
| Plate Covers | 1 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。