EliKine™ 人類 CCL3 ELISA 試劑盒
EliKine™ Human CCL3 ELISA Kit
廠牌
產品簡介
EliKine™ CCL3 ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的人類 C-C motif chemokine ligand 3 (CCL3) 濃度。檢測時，將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 CCL3 專一性捕捉抗體。樣本中的 CCL3 與捕捉抗體結合後，再加入生物素 (Biotin) 標記之 CCL3 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入鏈黴親和素－辣根過氧化物酶複合物 (Streptavidin-HRP conjugate)，使 HRP 與生物素標記偵測抗體結合。再次沖洗後加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 CCL3 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 CCL3 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：5–80 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：0.5 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體；透過生物素－鏈黴親和素系統 (Biotin-Streptavidin system) 連結 HRP 酵素標記物，加入酵素受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，並可透過標準曲線進行定量分析。
科學背景
C-C motif chemokine ligand 3 (CCL3)，又稱巨噬細胞發炎蛋白 1α (macrophage inflammatory protein-1 alpha, MIP-1α)，是 CC 趨化因子 (CC chemokine) 家族的重要成員，由 CCL3 基因所編碼。CCL3 為一種分泌型趨化因子，可由巨噬細胞、單核球、T 細胞 (T lymphocytes)、樹突細胞及其他免疫細胞於發炎或感染刺激下產生，參與先天性免疫與適應性免疫反應。CCL3 主要透過與趨化因子受體 CCR1 及 CCR5 結合，促進單核球、巨噬細胞、T 淋巴球及自然殺手細胞 (natural killer cells) 等免疫細胞募集至發炎部位，並調控細胞活化與發炎反應。此外，CCL3 亦參與造血調控、傷口修復及免疫微環境形成。近年研究指出，CCL3 表現異常與多種慢性發炎疾病、自體免疫疾病、感染性疾病及腫瘤微環境調控密切相關。因此，CCL3 濃度分析廣泛應用於免疫學、發炎反應、趨化因子及腫瘤微環境相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Human CCL3 Microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Human CCL3 Standard (160 pg/mL) | 0.5 mL | 0.5 mL | 4℃ |
| Standard Diluent | 1.5 mL | 1.5 mL | 4℃ |
| HRP-conjugated Human CCL3 Detect Antibody | 3 mL | 6 mL | 4℃ |
| Sample Diluent | 3 mL | 6 mL | 4℃ |
| HRP Substrate A | 3 mL | 6 mL | 4℃, protected from light |
| HRP Substrate B | 3 mL | 6 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 3 mL | 6 mL | 4℃ |
| Wash Buffer | 20 mL (20×) | 20 mL (30×) | 4℃ |
| Plate Covers | 2 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 6 個月。