EliKine™ 人類 CCL2 ELISA 試劑盒
EliKine™ Human CCL2 ELISA Kit
廠牌
產品簡介
EliKine™ CCL2 ELISA 試劑盒採用三明治型酵素免疫分析法 (Sandwich ELISA)，可定量分析血清、血漿及細胞培養上清液樣本中的人類 C-C motif chemokine ligand 2 (CCL2) 濃度。檢測時，將標準品或樣本加入試劑盒提供的微量盤中，盤孔底部已預先包被 CCL2 專一性捕捉抗體。樣本中的 CCL2 與捕捉抗體結合後，再加入生物素 (Biotin) 標記之 CCL2 專一性偵測抗體，形成抗體－抗原－抗體三明治複合體。沖洗去除未結合物質後，加入鏈黴親和素－辣根過氧化物酶複合物 (Streptavidin-HRP conjugate)，使 HRP 與生物素標記偵測抗體結合。再次沖洗後加入 TMB 受質溶液進行呈色反應，最後加入終止液 (stop solution) 停止反應，並於 450 nm 測定吸光值。在檢測範圍內，450 nm 吸光值與樣本中的 CCL2 濃度呈正比，可透過標準曲線定量分析 CCL2 濃度。
產品規格
- 適用樣本 (sample type)：血清、血漿、細胞培養上清液
- 偵測範圍 (detection range)：62.5–4000 pg/mL
- 靈敏度 (sensitivity)：30 pg/mL
- 分析內精密度 (intra-assay precision)：CV (%) <10%
- 分析間精密度 (inter-assay precision)：CV (%) <12%
- 檢測時間 (assay duration)：3–5 小時
- 檢測方法 (detection method)：比色法 (colorimetric)
- 分析類型 (assay type)：三明治 ELISA (Sandwich ELISA)
檢測原理
三明治 ELISA (Sandwich ELISA) 是檢測蛋白質、生長因子及細胞激素等生物分子的常用免疫分析技術，具有高專一性與高靈敏度。該方法採用兩株辨識不同抗原表位的專一性抗體，分別作為捕捉抗體與偵測抗體。當樣本中含有分析物時，可形成「捕捉抗體－分析物－偵測抗體」三明治複合體；透過生物素－鏈黴親和素系統 (Biotin-Streptavidin system) 連結 HRP 酵素標記物，加入酵素受質後產生顯色反應，其顏色深淺與樣本中的分析物濃度呈正比，並可透過標準曲線進行定量分析。
科學背景
C-C motif chemokine ligand 2 (CCL2)，又稱單核球趨化蛋白 1 (monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)，是 CC 趨化因子 (CC chemokine) 家族的重要成員，由 CCL2 基因所編碼。CCL2 為一種分泌型細胞激素，主要參與免疫調節與發炎反應，可透過與趨化因子受體 CCR2（以及部分情況下的 CCR4）結合，促進單核球 (monocytes)、記憶型 T 細胞 (memory T cells) 及樹突細胞 (dendritic cells) 向發炎部位募集。
CCL2 在先天性免疫與適應性免疫反應中具有重要功能，能調控免疫細胞遷移、組織修復及發炎微環境形成。研究顯示，CCL2 表現異常與多種慢性發炎疾病、自體免疫疾病、心血管疾病及腫瘤微環境調控有關，包括類風濕性關節炎 (rheumatoid arthritis)、乾癬 (psoriasis) 及動脈粥狀硬化 (atherosclerosis) 等。因此，CCL2 濃度分析廣泛應用於免疫學、發炎反應、腫瘤微環境及細胞激素相關研究。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Human CCL2 microplate | 48 wells | 96 wells | 4℃ |
| Human CCL2 standard (lyophilized) | 1 | 2 | 4℃ |
| Sample Diluent (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Assay Buffer (5×) | 3.5 mL | 7 mL | 4℃ |
| Human CCL2 Detect Antibody (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| Streptavidin-HRP (100×) | 60 μL | 120 μL | 4℃ |
| HRP Substrate (TMB) | 5 mL | 10 mL | 4℃, protected from light |
| Stop Solution | 5 mL | 10 mL | 4℃ |
| Wash Buffer (20×) | 25 mL | 50 mL | 4℃ |
| Plate Covers | 1 | 2 | RT |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。