miRNA cDNA 合成試劑盒

由 Applied Biological Materials (abm) 公司所開發的【miRNA cDNA 合成試劑盒 (G898)】是專為高效合成 miRNA 的 first-strand cDNA 所設計，適用於 Small RNA 和 Total RNA 樣本。此試劑盒包含所有必要組件，操作簡便，在單管反應中即可完成 RNA 分子的加 A 尾 (polyadenylation) 和反轉錄 (reverse transcription) 反應。整個流程利用 Poly(A) 聚合酶 (Poly(A) Polymerase)、OneScript® Plus 反轉錄酶 (OneScript® Plus Reverse Transcriptase)，以及可與加上 poly(A) 尾端之 miRNA 結合的改良型 Oligo d(T) with Adapter。試劑盒中提供的 SuperMix 含有 RNaseOFF 核糖核酸酶抑制劑 (RNaseOFF Ribonuclease Inhibitor)，可保護 RNA 免於降解。

合成完成的 miRNA 第一股 cDNA (first-strand miRNA cDNA) 可直接用來作為 miRNA qPCR 定量分析的模版，以偵測 miRNA 表現量——推薦搭配 abm【BlasTaq™ 2X qPCR 混合液 (G891)】與 abm miRNA qPCR primers 一起使用。每組 miRNA primer set 包含一個獨特的 miRNA 正向引子 (unique miRNA Forward Primer) 和一個通用的 3' miRNA 反向引子 (Universal 3' miRNA Reverse Primer)，該反向引子可與改良型 Oligo d(T) 上的接頭序列 (Adapter sequence on the modified Oligo d(T)) 互補結合。