細胞衰老檢測試劑盒(β-半乳糖苷酶)
Senescence β-Galactosidase Staining Kit
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產品簡介
當細胞進入衰老 (aging) 階段時，在形態學上會表現出細胞結構退化，例如核膜凹陷甚至崩塌、染色質 (chromatin) 結構改變，以及高二倍體 (hyperdiploid) 與異常多倍體 (polyploid) 細胞數量增加；此外，細胞膜脆性增加、通透性降低，且細胞膜受體 (membrane receptors) 種類、數量及其對配體 (ligand) 的敏感度亦會發生改變。在生理表現上，衰老細胞會出現功能下降與低代謝狀態，包括細胞週期停滯 (cell cycle arrest)、失去複製能力、對有絲分裂刺激的反應減弱，以及對促凋亡因子反應的改變。雖然衰老細胞不再進行複製，但仍能維持代謝活性。其中，衰老相關 β-半乳糖苷酶 (senescence-associated β-galactosidase, SA-β-Gal) 活性的增加，即被視為細胞衰老最關鍵的生物標記 (biomarker)。
Senescence β-Galactosidase Staining Kit (KTA3030) 提供了一套完整的試劑，用於偵測細胞或組織在 pH 6.0 環境下表現出的 SA-β-Gal 活性。SA-β-Gal 具有高度的專一性，僅存在於衰老細胞中，在預衰老 (pre-senescent)、靜止期 (quiescent)、腫瘤或永生化細胞 (immortal cells) 中均無法偵測到其活性。本試劑盒操作簡便且直觀，染色後的衰老細胞或組織在普通的光學顯微鏡下即可觀察到明顯的顯色結果，是研究細胞應激反應 (cell stress response)、發育生物學及抗衰老藥物篩選極佳的工具。
操作注意事項
- 本套組僅針對「衰老細胞」進行專一性顯色。預衰老、靜止期、腫瘤或永生化細胞將不會產生染色反應。
- 細胞衰老相關 beta-半乳糖苷酶 (SA-beta-Gal) 的染色反應極度依賴特定的 pH 環境 (pH 6.0)。因此，染色反應嚴禁在二氧化碳 (CO2) 培養箱中進行。培養箱內的高濃度 CO2 會導致染色工作液 (Staining Working Solution) 的 pH 值發生偏移，進而導致反應失敗。建議在一般不含 CO2 的恆溫箱進行孵育。若使用微量多孔盤進行反應，應以 parafilm 或微量盤封膜密封，以防止液體蒸發。
- 套組內包含的固定液 (Fixative Buffer) 對人體具有毒性與腐蝕性，操作時請務必在通風櫥中進行，並穿戴實驗衣、手套及護目鏡等個人防護裝備。
- 儲存於 -20°C 或 4°C 的 X-gal 溶液，在使用前應置於室溫，或放入 37°C 水浴槽中孵育 2-5 分鐘使其完全融化，並適度搖晃均勻。
- 若試劑溶解後或使用前發現有沉澱，請務必確保其完全溶解。特別是 Reagent C 從試劑盒取出時，底部可能有少量沉澱，此為正常現象，充分混合後即可溶解。配製染色工作液 (Staining Working Solution) 時，若出現少量絮狀沉澱，請務必搖晃至其完全溶解後再行使用。
套組內容物
| Kit components | Size (100 T) | Storage conditions |
| 10×Fixation Buffer | 15 mL | -20℃ |
| 10×PBS | 50 mL | 4℃ |
| Reagent A | 1.5 mL | -20℃ |
| Reagent B | 1.5 mL | -20℃ |
| Reagent C | 1.5 mL | -20℃ |
| X-Gal solution | 6 mL | -20℃, protected from light |
儲存條件
自出貨日起，在建議溫度下可穩定保存至少 12 個月。