CheKine™ 烏頭酸酶 (Aconitase) 活性比色測定試劑盒
CheKine™ Micro Aconitase (ACO) Activity Assay Kit
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產品簡介
本試劑盒提供了一種簡便且靈敏的方法，用於偵測多種生物樣本中的烏頭酸酶 (aconitase, ACO) 活性。其偵測原理是先利用烏頭酸酶將檸檬酸 (citrate) 轉化為異檸檬酸 (isocitrate)，接著再透過異檸檬酸脫氫酶 (isocitrate dehydrogenase, ICDH) 介導的偶聯反應，在 NAD+ 存在下將異檸檬酸氧化，同時將 NAD+ 還原為 NADH。由於 NADH 在 340 nm 處具有特徵吸收峰，透過偵測 340 nm 吸光值的上升速率，即可精確反映樣本中烏頭酸酶的酵素活性。
主要特色
- 適用於動物組織、植物組織、細胞、血清 (serum) 及血漿 (plasma) 等多種生物樣本。
- 操作步驟簡單，並提供詳細的樣品製備和結果計算方法，確保實驗結果精確可靠。
實驗注意事項
- 需使用 96 孔可透 UV 平底盤 (96 well clear flat bottom UV-transparent microplate) 或微量石英比色皿 (Micro quartz cuvette)。
- 樣本製備過程必須在冰上進行，以防止酵素失活。酵素活性應於取樣當日完成測定，並避免樣本反覆凍融。
- 勿混用不同批號或廠商生產的試劑，以免導致結果異常。
科學背景
烏頭酸酶 (aconitase, ACO) 是參與三羧酸循環 (tricarboxylic acid cycle, TCA cycle) 的一種酵素，負責催化檸檬酸 (citric acid) 轉化為異檸檬酸 (isocitrate)。由於檸檬酸分子結構穩定不易被氧化，烏頭酸酶透過脫水與再水合 (dehydration and rehydration) 反應，將羥基 (hydroxyl group) 從 β-碳原子轉移至 α-碳原子，生成易於氧化的異檸檬酸，為進一步的氧化脫羧反應 (oxidative decarboxylation reaction) 做準備。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Extraction Buffer | 60 mL | 60×2 mL | 4℃ |
| Reagent Ⅰ | 12 mL | 24 mL | 4℃ |
| Reagent Ⅱ | 0.75 mL | 1.5 mL | -20℃, protected from light |
| Reagent Ⅲ | 10 mL | 20 mL | 4℃ |
| Reagent Ⅳ | Powder×1 vial | Powder×1 vial | -20℃, protected from light |
| Reagent V | Powder×1 vial | Powder×1 vial | -20℃, protected from light |
| Reagent Ⅵ | Powder×1 vial | Powder×1 vial | -20℃, protected from light |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 6 個月。