CheKine™ 乙醯輔酶 A (Acetyl-CoA) 檢測試劑盒
CheKine™ Micro Acetyl Coenzyme A (Acetyl-CoA) Assay Kit
廠牌
產品簡介
本試劑盒提供了一種簡便、靈敏且快速的方法，用於偵測多種生物樣本中的乙醯輔酶 A (acetyl coenzyme A, acetyl-CoA) 含量。其偵測原理是先利用蘋果酸脫氫酶 (malate dehydrogenase, MDH) 催化蘋果酸 (malic acid) 與 NAD 生成草醯乙酸 (oxaloacetic acid) 與 NADH；接著再透過檸檬酸合成酶 (citrate synthase, CS) 催化草醯乙酸與樣本中的 acetyl-CoA 反應，生成檸檬酸 (citric acid) 與輔酶 A (CoA)。基於 MDH 與 CS 的偶聯反應，NADH 的生成速率將與樣本中的 acetyl-CoA 含量成正比。由於 NADH 在 340 nm 處具有特徵吸收峰，因此透過偵測 340 nm 吸光值的上升速率，即可精確計算出 acetyl-CoA 的含量。
主要特色
- 適用於動物組織、植物組織及細胞等多種生物樣本。
- 提供詳盡的樣本製備流程、結果計算方法，並隨附標準品與標準曲線 (standard curve) 設置指引。
實驗注意事項
- 需使用 96 孔可透 UV 平底盤 (96 well clear flat bottom UV-transparent microplate) 或微量石英比色皿 (Micro quartz cuvette)。
- 應使用新鮮樣本進行 acetyl-CoA 的萃取，以確保量測結果的準確性。
- 所有樣本與試劑應置於冰上，以避免 acetyl-CoA 降解與反應酵素失活。
- 若 OD 值高於 1.5，請減少樣本組織用量；若 OD 值過低，請減少萃取緩衝液 (Extraction Buffer) 的體積以增加樣本濃度。
- 勿混用不同批號或廠商生產的試劑，以免導致結果異常。
- 混合試劑時應避免產生氣泡。
- 實驗開始前，確保所有試劑與設備均已達到適宜的實驗溫度。
科學背景
乙醯輔酶 A (acetyl coenzyme A, acetyl-CoA) 廣泛存在於動物、植物、微生物和培養細胞中，是生物體代謝過程中極為重要的中間代謝產物 (intermediate metabolite)，也是能量代謝的核心轉折點。醣類、脂質與蛋白質三大營養素在分解代謝後，皆會匯聚形成 acetyl-CoA，進入三羧酸循環 (tricarboxylic acid cycle, TCA cycle) 並進行氧化磷酸化 (oxidative phosphorylation)，最終生成二氧化碳、水及 ATP。此外，acetyl-CoA 也是合成脂肪酸、酮體 (ketone bodies)、膽固醇及其衍生物的重要前驅物質。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Extraction Buffer | 60 mL | 60 mL×2 | 4℃ |
| Reagent Ⅰ | Powder×2 vials | Powder×2 vials | -20℃, protected from light |
| Reagent Ⅱ | 3.5 μL×2 | 7 μL×2 | 4℃, protected from light |
| Reagent Ⅲ | Powder×2 vials | Powder×2 vials | -20℃, protected from light |
| Reagent Ⅳ | 40 mL | 40 mL×2 | 4℃ |
| Standard (NADH) | Powder×2 vials | Powder×2 vials | -20℃, protected from light |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 6 個月。