CheKine™ 6-磷酸果糖激酶 (PFK) 活性檢測試劑盒
CheKine™ Micro 6-Phosphofructokinase (PFK) Activity Assay Kit
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產品簡介
本試劑盒提供了一種簡便且快速的方法，用於偵測多種生物樣本中的 6-磷酸果糖激酶 (6-phosphofructokinase, PFK) 活性。其偵測原理是先利用 PFK 催化 6-磷酸果糖 (fructose 6-phosphate) 與 ATP 反應，生成 1,6-二磷酸果糖 (fructose 1,6-bisphosphate) 與 ADP。隨後透過丙酮酸激酶 (pyruvate kinase) 與乳酸脫氫酶 (lactate dehydrogenase) 的偶聯反應，將 NADH 氧化為 NAD+。由於 NADH 在 340 nm 處具有特徵吸收峰，透過偵測 340 nm 吸光值的下降速率，即可精確反映樣本中的 PFK 酵素活性。
主要特色
- 適用於動物組織、植物組織、細胞、細胞培養上清液 (cell culture supernatant)、細菌、血清及血漿 (plasma) 等多種生物樣本。
- 操作步驟簡單，並提供詳細的樣品製備和結果計算方法，確保實驗結果精確可靠。
實驗注意事項
- 需使用 96 孔可透 UV 平底盤 (96 well clear flat bottom UV-transparent microplate) 或微量石英比色皿 (Micro quartz cuvette)。
- 若使用血清或血漿樣本，建議在採血後儘速完成檢測。
- 勿混用不同批號或廠商生產的試劑，以免導致結果異常。
- 混合試劑時應避免產生氣泡。
- 實驗開始前，確保所有試劑與設備均已達到適宜的實驗溫度。
科學背景
6-磷酸果糖激酶 (6-phosphofructokinase, PFK; EC 2.7.1.11) 廣泛存在於動物、植物、微生物和培養細胞中，是糖解作用 (glycolysis) 途徑中最為關鍵的調控酵素之一。PFK 負責催化 6-磷酸果糖 (fructose 6-phosphate) 和 ATP 轉化為 1,6-二磷酸果糖 (fructose 1,6-bisphosphate) 和 ADP 的反應，是調控細胞能量代謝流向的核心開關。其活性高低受細胞內能量狀態（如 ATP/ADP 比值 (ATP/ADP ratio)）的精密調控，是代謝疾病、癌症生物學及環境生理學研究中的重要指標。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Extraction Buffer | 50 mL | 100 mL | 4℃ |
| Assay Buffer | 10 mL | 20 mL | 4℃ |
| Substrate Mix | 1 | 1 | 4℃, protected from light |
| Enzyme 1 | 500 μL | 1 mL | -20℃, protected from light |
| Enzyme 2 | 500 μL | 1 mL | -20℃, protected from light |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。