CheKine™ 輔酶 Ⅱ NADP(H) 檢測試劑盒
CheKine™ Micro Coenzyme Ⅱ NADP(H) Assay Kit
廠牌
產品簡介
本試劑盒提供了一種簡便且靈敏的方法，用於偵測多種生物樣本中的 NADP+ 與 NADPH 濃度及其比值。本試劑盒採用的是酵素循環反應 (enzyme cycling reaction)，這種方法能大幅提升偵測靈敏度，且能專一性辨識 NADP+/NADPH，不會與 NAD+/NADH 產生交叉反應。其偵測原理是利用特定酵素先將樣本中的 NADP+ 還原為 NADPH，隨後 NADPH 在中間電子載體（通常為 1-methoxy PMS）的幫助下，將電子傳遞給 WST-8，使其還原為橙黃色甲臢染料 (formazan dye)。透過偵測 450 nm 吸光值的變化，即可評估樣本中的 NADP+/NADPH 含量，其顯色強度與 NADP+/NADPH 濃度成正比。
主要特色
- 適用於測定動物組織、細胞、細菌等各種生物樣本的 NADP+/NADPH 濃度和比值。
- 偵測範圍 0.5-10 µM，偵測極限 (LOD) 0.5 µM。
- 提供詳盡的樣本製備流程、結果計算方法，並隨附標準品與標準曲線 (standard curve) 設置指引。
- 步驟簡易，提高實驗效率。
實驗注意事項
- 加入工作試劑 (Working Reagent) 時應迅速，混合應簡短但徹底。
- 下列物質會干擾樣品製備，應避免使用：EDTA (>0.5 mM)、抗壞血酸 (ascorbic acid)、SDS (>0.2%)、疊氮化鈉 (sodium azide)、NP-40 (>1%) 及 Tween-20 (>1%)。
科學背景
菸鹼醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADP) 是一種酵素輔助因子 (cofactor)，參與多種氧化還原反應 (redox reactions)，並在氧化態 (NADP+) 與還原態 (NADPH) 之間循環。NADP 也參與脂質和核酸合成等生物合成反應，在其中發揮還原劑 (reducing agent) 的作用。五碳糖磷酸途徑 (pentose phosphate pathway, PPP) 的氧化分支是動物細胞產生 NADPH 的主要來源。定量檢測 NADP+/NADPH 有助於了解細胞或組織的能量轉化與氧化還原狀態。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Assay Buffer | 7.5 mL | 15 mL | 4℃ |
| Glucose (1 M) | 1 mL | 2 mL | 4℃ |
| WST-8 | 300 μL | 600 μL | -20℃, protected from light |
| Enhancer | 60 µL | 120 µL | -20℃, protected from light |
| NADP Cycling Enzyme Mix | 60 µL | 120 µL | -20℃, protected from light |
| NADPH Standard (10 mM) | 100 µL | 200 µL | -20℃, protected from light |
| NADP Extraction Buffer | 6 mL | 12 mL | 4℃ |
| NADPH Extraction Buffer | 6 mL | 12 mL | 4℃ |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 6 個月。