CheKine™ 硫氧還蛋白過氧化物酶 (TPX) 檢測試劑盒
CheKine™ Micro Thioredoxin Peroxidase (TPX) Assay Kit
產品簡介
本試劑盒提供了一種簡便且準確的方法,用於偵測多種生物樣本中的硫氧還蛋白過氧化物酶 (thioredoxin peroxidase, TPX) 活性。其偵測原理是利用 TPX 能夠催化過氧化氫 (H2O2) 氧化二硫蘇糖醇 (dithiothreitol, DTT),由於 H2O2 在 240 nm 處具有特徵吸收峰,透過偵測 240 nm 吸光值的下降速率,即可了解 H2O2 的消耗速率,進而推算出酵素活性。由於生物樣本中通常同時含有 TPX 和過氧化氫酶 (catalase, CAT),這兩種酶都會降解 H2O2,因此直接測量到的吸光度變化代表了兩種酶活性的總和。為了區分這兩種酶的貢獻,本試劑盒採用了分開測量再計算的方式,實驗設置了兩種測量孔:一個是「總活性測量孔」,用於測量所有 H2O2 降解酶的總活性;另一個是「CAT 活性測量孔」,用於單獨測量 CAT 活性。最後,將總活性減去 CAT 活性,即可計算出單獨的 TPX 活性。
主要特色
- 適用於動物組織、細胞、細菌、血清 (serum) 及血漿 (plasma) 等多種生物樣本。
- 操作步驟簡單,並提供詳細的樣品製備和結果計算方法,確保實驗結果精確可靠。
- 透過實驗設計能有效區分並定量 TPX 與 CAT 酵素活性。
實驗注意事項
- 需使用 96 孔可透 UV 平底盤 (96 well clear flat bottom UV-transparent microplate) 或微量石英比色皿 (Micro quartz cuvette)。
- 所有操作均需在冰上進行,酵素活性測定應於當日完成,以避免均質液反覆凍融。
- 檢測細胞內 TPX 硫氧還蛋白過氧化物酶活性時,細胞數量必須在 3-5 x 106 之間;細胞內 TPX 的萃取建議使用 Assay Buffer 配合研磨或超音波處理進行,不可使用裂解液處理細胞。
科學背景
硫氧還蛋白過氧化物酶 (thioredoxin peroxidase, TPX) 屬於過氧化酶 (peroxidase) 家族,主要透過還原體內的過氧化氫 (H2O2) 和某些氫過氧化物 (hydroperoxides) 來實現抗氧化作用。TPX 的生理功能與穀胱甘肽過氧化酶 (glutathione peroxidase, GPX) 相似,皆是維持細胞氧化還原平衡的重要酵素。TPX 廣泛存在於酵母、植物、動物、原生動物、寄生蟲、細菌和古菌等多種生物體中,且在演化過程中高度保留。TPX 與細胞增殖、分化、凋亡及腫瘤發生密切相關,其主要功能包括細胞解毒、抗氧化以及調節由過氧化氫介導的訊號傳遞與免疫反應。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Assay Buffer | 50 mL | 100 mL | Room temperature |
| Substrate | 10 mL | 20 mL | -20°C, protected from light |
| H2O2 | 1 mL | 2 mL | 4℃, protected from light |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。
