CheKine™ 硫氧還蛋白還原酶 (TrxR) 檢測試劑盒
CheKine™ Micro Thioredoxin Reductase (TrxR) Assay Kit
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產品簡介
本試劑盒提供了一種簡便且準確的方法，用於偵測多種生物樣本中的硫氧還蛋白還原酶 (thioredoxin reductase, TrxR) 活性。其偵測原理是利用 TrxR 催化 NADPH 還原 DTNB (5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoic acid)，生成 NADP+ 與黃色產物 TNB (5-thio-2-nitrobenzoic acid)。透過偵測 412 nm 吸光值的增加速率，即可精準定量樣本的 TrxR 酵素活性。由於還原型穀胱甘肽 (reduced glutathione, GSH) 也會與 DTNB 反應生成 TNB，因此本試劑盒特別隨附 2-乙烯基吡啶 (2-vinylpyridine) 以抑制樣本中 GSH 的干擾。
主要特色
- 適用於動物組織、細胞、細菌、血清 (serum) 及血漿 (plasma) 等多種生物樣本。
- 使用 2-乙烯基吡啶 (2-vinylpyridine) 抑制內源性 GSH 干擾，確保檢測結果的準確性。
- 操作步驟簡單，並提供詳細的樣品製備和結果計算方法，確保實驗結果精確可靠。
實驗注意事項
- 所有操作均需在冰上進行，酵素活性測定應於當日完成，以避免均質液反覆凍融。
- 檢測細胞內 TrxR 硫氧還蛋白還原酶活性時，細胞數量必須在 3-5 x 106 之間；細胞內 TrxR 的萃取可透過研磨或超音波處理進行，不可使用裂解液處理細胞。
科學背景
硫氧還蛋白還原酶 (thioredoxin reductase, TrxR) 是一種 NADPH 依賴性二聚體硒酶 (dimer selenase)，含有 FAD 結構區域。它屬於吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶 (pyridine nucleotide-disulfide oxidoreductases) 家族，與硫氧還蛋白 (thioredoxin, Trx) 及 NADPH 共同組成硫氧還蛋白系統。TrxR 具有與穀胱甘肽還原酶 (glutathione reductase, GR) 類似的活性，能催化氧化型穀胱甘肽 (GSSG) 還原為還原型穀胱甘肽 (GSH)，使其能在特定條件下參與並支援穀胱甘肽氧化還原循環 (glutathione redox cycle)，是細胞氧化還原調節網絡中的關鍵酵素之一。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Assay Buffer | 50 mL | 100 mL | 4℃ |
| Chromogen | 1 | 1 | 4℃, protected from light |
| TrxR Cofactor | 1 | 1 | -20℃, protected from light |
| Inhibitor | 60 μL | 120 μL | -20℃, protected from light |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。