CheKine™ 穀胱甘肽過氧化物酶 (GSH-Px) 活性檢測試劑盒
CheKine™ Micro Glutathione Peroxidase (GSH-Px) Activity Assay Kit
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產品簡介
本試劑盒提供了一種簡便且高靈敏度的比色分析法，用於偵測多種生物樣本中的穀胱甘肽過氧化物酶 (glutathione peroxidase, GSH-Px) 活性。其偵測原理是利用穀胱甘肽過氧化物酶能與 H2O2 反應，將還原型穀胱甘肽 (reduced glutathione, GSH) 氧化為氧化型穀胱甘肽 (GSSG) 的特性，再透過穀胱甘肽還原酶 (glutathione reductase, GR) 與 NADPH 作用反應，將生成的 GSSG 重新還原為 GSH，同時 NADPH 會被氧化為 NADP+。由於 NADPH 在 340 nm 具有特徵吸收峰，而 NADP+ 則無，因此透過偵測 340 nm 吸光值的下降速率，即可計算出 NADPH 的氧化速率，進而定量樣本中的穀胱甘肽過氧化物酶活性。
主要特色
- 適用於多種類型的生物樣本，包含血清 (serum)、動物組織、細胞及細菌等。
- 操作步驟簡單，並提供詳細的樣品製備和結果計算方法，確保實驗結果精確可靠。
實驗注意事項
- 需使用 96 孔可透 UV 平底盤 (96 well clear flat bottom UV-transparent microplate) 或微量石英比色皿 (Micro quartz cuvette)。
- 所有操作均需在冰上進行，酵素活性測定應於當日完成，以避免均質液反覆凍融。
- 混合試劑配製完成後請放置於冰上備用。
- 測定過程應快速進行，僅需設置 1 至 2 個空白孔 (blank well)。
- 反應溫度會影響實驗結果。哺乳動物樣本的反應溫度為 37℃，其他物種樣本的反應溫度為 25℃。
科學背景
穀胱甘肽過氧化物酶 (glutathione peroxidase, GSH-Px) 是穀胱甘肽氧化還原循環 (glutathione redox cycle) 中催化還原型穀胱甘肽 (GSH) 氧化的主要酵素之一。GSH-Px 不僅能專一性地催化 GSH 與活性氧 (reactive oxygen species, ROS) 反應，生成氧化型穀胱甘肽 (GSSG)，從而保護細胞構造免受 ROS 損傷並維持細胞正常功能；它還具有保護肝臟、增強身體免疫力、對抗有害金屬離子，以及提高身體抵抗輻射能力等作用。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Assay Buffer | 60 mL+20 mL | 60 mL×2+20 mL | 4℃ |
| Substrate | Powder×1 vial | Powder×1 vial | -20℃, protected from light |
| GR | 5 μL | 5 μL | 4℃, protected from light |
| H2O2 | 200 μL | 200 μL | 4℃, protected from light |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 12 個月。