CheKine™ O2- 超氧陰離子比色測定試劑盒
CheKine™ Micro Superoxide Anion Assay Kit
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產品簡介
本試劑盒提供了一種簡便的方法，用於偵測多種生物樣本中的超氧陰離子 (superoxide anion, O2-) 含量。其偵測原理是利用樣本中的 O2- 與鹽酸羥胺 (hydroxylamine hydrochloride) 反應生成亞硝酸鹽 (NO2-)，接著利用 Griess 法進行分析。在酸性環境下，NO2- 與磺胺 (sulfonamides) 反應生成重氮化合物 (diazonium species)，隨後與萘基乙二胺 (N-(1-Naphthyl)ethylenediamine dihydrochloride, NED) 發生偶氮耦合反應，生成在 540 nm 處具有特徵吸收峰的紅色偶氮化合物 (azo compound)。透過測量 540 nm 的吸光值，即可計算出樣本中 O2- 的含量。
主要特色
- 適用於多種類型的生物樣本，包含血清 (serum)、血漿 (plasma)、動植物組織及細胞等。
- 偵測範圍 0.001-0.2 µmoL/mL，偵測極限 (LOD) 0.001 µmoL/mL。
- 提供詳盡的樣本製備流程、結果計算方法，以及標準溶液與標準曲線 (standard curve)。
- 步驟簡易，提高實驗效率。
實驗注意事項
- 樣本對照組設定：為排除樣本本身已存在的 NO2- 干擾，每個樣本皆需設置一個對照孔 (control well)。因此，96 T 包裝的試劑盒實際上僅可測量 48 個樣本。
- 自備試劑：實驗過程中需自備氯仿 (chloroform)。
- 操作細節：在混合或配製反應試劑時應避免產生泡沫或氣泡。為防止交叉污染，在加入標準品、樣本與試劑時應更換 pipette tips，並為每種試劑準備獨立的儲液槽 (reservoir)。
- 試劑管理：請勿混用不同批號或其他供應商的試劑。開始實驗前，請確保所有試劑與設備均處於適宜的反應溫度。
科學背景
超氧陰離子 (O2-) 等活性氧 (reactive oxygen species, ROS) 在生物體內具有免疫和訊號傳導作用。然而，當其累積過多時，會破壞細胞膜和生物大分子，導致體內細胞和組織代謝異常，進而引發多種疾病。
套組內容物
| Kit components | Size | Storage conditions | |
| 48 T | 96 T | ||
| Extraction Buffer | 80 mL | 80 mL×2 | 4℃ |
| Reagent Ⅰ | 6 mL | 12 mL | 4℃ |
| Reagent Ⅱ | 9 mL | 18 mL | 4℃, protected from light |
| Reagent Ⅲ | 9 mL | 18 mL | 4℃, protected from light |
| NaNO₂ Standard (10 mmoL/L) | 0.5 mL | 0.5 mL | 4℃ |
儲存條件
在建議儲存條件下可穩定保存 6 個月。