CheKine™ 過氧化氫酶/觸酶 (Catalase) 活性檢測試劑盒

CheKine™ Micro Catalase (CAT) Activity Assay Kit

貨號

KTB1040

包裝

96 T
480 T

廠牌

Abbkine

產品簡介

本試劑盒提供了一種簡便的比色分析法,用於偵測組織/細胞裂解液 (tissue/cell lysates) 或生物體液等各種生物樣本中的過氧化氫酶 (觸酶) (catalase, CAT) 活性。其偵測原理是利用過氧化氫酶的「過氧化物酶功能 (peroxidatic function)」能在適宜濃度的 H2O2 存在下,催化甲醇 (methanol) 反應生成甲醛 (formaldehyde) 的特性,再加入能與甲醛反應的顯色劑,即可藉由偵測 540 nm 吸光值,定量樣本中的過氧化氫酶活性,其訊號強度與酵素活性成正比。

Formaldehyde standard curve. The y-axis is absorbance of standards and the x-axis is final formaldehyde concentration (µM).

主要特色

  • 適用於多種類型的生物樣本,包含血清 (serum)、血漿 (plasma)、動植物組織及細胞等。
  • 專一性極佳,利用過氧化氫酶的過氧化物酶功能測定活性,不會受到其他過氧化物酶 (peroxidases) 的干擾。
  • 靈敏度高,可偵測低至 2 U/ml 的過氧化氫酶活性。
  • 具備廣泛的線性範圍(2-75 µM)。

實驗注意事項

  • 若不立即進行檢測,樣本可儲存於 -80°C。
  • 過熱會使過氧化氫酶失去活性。在樣品製備和檢測過程中,應保持酵素處於低溫狀態。
  • 通常過氧化氫酶在高倍稀釋下會非常不穩定。建議將樣本濃縮後儲存,並在稀釋後 30 分鐘內進行檢測。

科學背景

過氧化氫酶 (catalase, CAT; EC 1.11.1.6),又稱為觸酶,是一種常見的抗氧化酶 (antioxidant enzyme),主要功能是可以將過氧化氫 (H2O2) 分解為水和氧氣,廣泛存在於含有細胞色素系統 (cytochrome system) 的嗜氧細胞中 (aerobic cells)。過氧化氫對細胞具有高度毒性,其過量堆積會導致 DNA、蛋白質與脂質等細胞標靶被氧化,進而引發突變和細胞死亡。利用過氧化氫酶清除過氧化氫,可保護細胞免受氧化損傷 (oxidative damage)。過氧化氫酶在氧化壓力 (oxidative stress) 相關疾病中的作用已被廣泛研究。此外,過氧化氫酶還具有過氧化物酶活性 (peroxidatic activity),能利用低分子量醇類 (low molecular weight alcohols) 作為電子供應者;由於脂肪醇 (aliphatic alcohols) 是過氧化氫酶的專一性受質 (substrates),其他具有過氧化物酶活性的酵素無法利用這些受質,因此本偵測方法具有極高的專一性

套組內容物

Kit componentsSizeStorage conditions
96 T480 T
Assay Buffer (10×)10 mL50 mL4℃
Sample Diluent (10×)12 mL60 mL4℃
Lysis Buffer (10×)12 mL60 mL4℃
Methanol4 mL20 mL4℃
Formaldehyde Standard (4.25 M)100 μL100 μL4℃
Catalase (Control)Powder×1 vialPowder×1 vial-20℃
Potassium Hydroxide4 mL20 mL4℃
Hydrogen Peroxide1 mL5 mL-20℃
Chromogen4 mL20 mL-20℃, protected from light
Potassium Periodate2 mL10 mL4℃

儲存條件

在建議儲存條件下可穩定保存 6 個月。

產品說明書

KTB1040 CheKine™ Micro Catalase (CAT) Activity Assay Kit
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