黴漿菌 (Mycoplasma) 是細胞培養中最常被忽略的污染源
黴漿菌是細胞培養中最常見、卻也最容易被忽略的污染問題之一。與一般的細菌 (Bacteria) 或真菌 (Fungi) 污染不同,受黴漿菌感染後的細胞通常不會出現培養基混濁、沉澱或 pH 值急遽變化等肉眼可見的異狀。這導致研究人員常在未察覺的情況下,持續使用受污染的細胞進行實驗。
黴漿菌不會殺死細胞,卻會悄悄改變實驗結果
即使細胞外觀與型態正常,黴漿菌仍會在分子層次上深度干擾細胞生理功能,包括細胞增殖 (cell proliferation)、代謝反應 (metabolism)、基因合成及過程 (gene synthesis & processing),以及細胞貼附特性 (adhesion properties)。這類變化往往不易即時察覺,卻可能造成實驗數據的系統性偏差,使研究結果失去可信度與可再現性 (reproducibility)。
為什麼黴漿菌特別難清除?
黴漿菌是是目前已知可自我複製的最小原核微生物 (prokaryotic microorganisms)。與一般細菌不同,它們缺乏細胞壁、形態不固定且體積極小(約 0.1 至 0.3 µm),可輕易通過滅菌常用的 0.22 µm 濾膜。也因為缺乏細胞壁,許多常用抗生素(如盤尼西林 (penicillin) 或 β-內醯胺類抗生素 (β-lactams))對黴漿菌幾乎無效,使得污染一旦發生,往往難以透過常規方式徹底清除。此外,它們在培養基中僅會形成極小的菌落 (colony),必須在顯微鏡下以特殊倍率觀察,日常巡檢極難發現。
黴漿菌檢測已成為研究品質控管 (quality control, QC) 的一環
為了維護學術誠信,近年來已有許多學術期刊出版商要求作者在提交論文稿件時,同時提供細胞的黴漿菌檢測結果,以確保論文數據的準確性。這顯示黴漿菌檢測已不再只是實驗室的良好習慣,而是確保數據準確性與可信度不可或缺的標準程序。
定期檢測,避免後續更高昂的實驗成本與數據風險
在日常細胞培養過程中,建議定時監控檢查二氧化碳培養箱 (CO2 incubator) 與培養基是否受到黴漿菌污染,以及早發現並隔離受污染樣本,避免交叉污染與防止污染擴散。相較於後續才去進行細胞去污處理 (cell decontamination)、重新購置/鑑定細胞株,甚至重做整批實驗,前期的例行性檢測(如 PCR 檢測法)能有效節省大量時間與研究成本。