永生化人類足細胞前驅細胞株
Immortalized Podocyte Progenitor Cell Line (UM51-Pre-Podo-hTERT)
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產品簡介
永生化人類足細胞前驅細胞株 (UM51-Pre-Podo-hTERT) 源自於一位 51 歲非洲男性尿液中分離的前驅細胞，並經 hTERT 永生化。此細胞株已被證實能夠無限增殖，同時保有足細胞的關鍵特徵，並表現有多種足細胞專一性標記物，例如 WT1、NPHS1 和 SYNPO，這些標記對於理解足細胞的分化和功能至關重要。儘管經過持續培養，UM51-Pre-Podo-hTERT 細胞仍能維持穩定的形態、增殖能力以及關鍵足細胞標記物的表達。此外，UM51-Pre-Podo-hTERT 細胞也展現出接觸抑制 (contact inhibition) 特性以及具有 p53 表現，顯示其維持有正常的細胞調控機制。實驗證實，UM51-Pre-Podo-hTERT 細胞可分化為成熟的足細胞，並能進入 G0 期，因此適用於研究足細胞的成熟和功能，以及建構足細胞靜止和重新進入細胞週期發揮作用的疾病模型。總而言之，永生化人類足細胞前驅細胞株 (UM51-Pre-Podo-hTERT) 是研究腎臟生成 (nephrogenesis) 和腎臟相關疾病的理想模型。
注意事項
僅供研究使用，不適用於診斷或治療用途
細胞型態
貼附性、鵝卵石樣 (Adherent, cobblestone-like)
來源組織
腎
物種
人類
捐贈者資訊
51 歲，男性，非裔，尿液
產品開箱和儲存說明
- 收到貨品時，請先目視檢查包裝容器是否有洩漏或破損的跡象。確認包裝容器完整後，立即將細胞轉移至低於 -130°C 的溫度下，最好在液態氮中儲存，直到準備使用。
- 為確保最佳的細胞活力，請在收到後儘快解凍試管並開始培養。如果需要繼續儲存，試管應儲存在 -130°C 以下或液態氮中。請勿儲存在 -70°C，因為這會導致細胞喪失活性。
細胞解凍 (Thawing)
- 將細胞放入 37°C 水浴中快速解凍，同時輕輕攪拌（最多 2 分鐘）。瓶蓋應保持在水面以上，以降低污染風險。
- 用 70% 酒精噴灑並擦拭試管外部，進行消毒。此後，所有操作應在生物安全櫃內無菌條件下進行。
- 將細胞懸浮液移至 15ml 無菌離心管中（內含 5ml 預熱的完全培養基）。以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸去上清液，不要攪動細胞沉澱物。將細胞沉澱物重新懸浮於預熱的完全培養基中，並分裝至 T25 培養瓶中。
- 在建議的條件下培養細胞。
細胞生長條件
- 使用明膠塗層 (gelatin coating) (TM063) 是細胞貼附於培養容器和實現最佳增殖所必需的。
- T0208 細胞株專用 PriGrow X 系列培養基 (TM0208) + 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (Penicillin/Streptomycin Solution) (G255)，37.0°C，5% CO₂。
- 💡 注意：細胞表現出接觸抑制，當細胞覆蓋率達到 70% 時應進行繼代培養以維持其特性。
細胞繼代培養 (Subculture)
以下體積適用於 T75 細胞培養瓶，請依培養容器大小按比例增減體積。當細胞覆蓋率達到 70% 滿度時，即可進行繼代培養。細胞表現出接觸抑制現象。
- 吸出培養基，並在培養容器中加入 2-3ml 預熱的 0.25% Trypsin-EDTA 胰蛋白酶 (TM050)。
- 在顯微鏡下觀察細胞是否自附著表面脫落分離（通常需要 2-10 分鐘）。對於難以脫離的細胞，可置於 37°C 下，靜置幾分鐘以促進脫離。
- 將等體積的完全培養基加入培養容器中，以中和 Trypsin-EDTA 胰蛋白酶。
- 將培養懸浮液轉移至無菌離心管中，125xg 離心 5 分鐘。實際離心時間和轉速可能因細胞類型而異。
- 吸出上清液，用預熱的新鮮完全培養基重新懸浮細胞沉澱物。根據需要，將適量的細胞懸浮液加入新的培養容器中。
- 在建議的條件下培養細胞。
細胞冷凍保存 (Cryopreservation)
使用細胞冷凍液 (TM024)，或含 10% DMSO 的完全培養基
稀釋比例 (Split ratio)
1:10
細胞倍增時間
48 小時
表現
NPHS1、WT1、對新黴素有抗藥性 (Neomycin resistance)