永生化人類子宮內膜基質細胞
Immortalized Human Endometrial Stromal Cells (HESC)
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產品簡介
子宮內膜蛻膜化 (decidualization) 主要由黃體素 (progesterone) 誘導，是子宮內膜重塑的過程。在此過程中，子宮內膜間質細胞分化為分泌性蛻膜細胞 (secretory decidual cells)，為懷孕做準備。蛻膜化的子宮內膜間質細胞的特徵是釋放催乳素 (prolactin, PRL)、類胰島素生長因子結合蛋白-1 (IGFBP-1)、組織因子 (tissue factor, TF)、纖維蛋白溶酶原活化物第一型抑制物 (plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)，並表達基底膜成分 (basal lamina components)，如層黏連蛋白 (laminin)、第四型膠原蛋白 (collagen IV) 和纖維黏連蛋白 (fibronectin)。
永生化人類子宮內膜基質細胞 (HESC) 的獨特之處在於：(1) 它們表現出正常的核型 (karyotype)；(2) 它們對激素刺激有反應，並且在投予雌二醇 (estradiol) 和 Medroxyprogesterone 藥物後，仍能保持蛻膜化的形態模式和生化終點 (biochemical endpoints)。這使得 HESC 細胞株成為研究子宮內膜穩定 (endometrium homeostasis) 和女性生殖的寶貴工具。 💡 注意：HESC 細胞是從接受子宮切除術的女性的子宮內膜中收集的，因為這些細胞被混合在一起以產生該細胞株，因此沒有特定的年齡。
注意事項
僅供研究使用，不適用於診斷或治療用途
細胞型態
貼附性、纖維母細胞樣 (Adherent, fibroblast-like)
來源組織
子宮內膜
物種
人類
捐贈者資訊
女性，成人，非惡性肌瘤（子宮肌瘤）
產品開箱和儲存說明
- 收到貨品時，請先目視檢查包裝容器是否有洩漏或破損的跡象。確認包裝容器完整後，立即將細胞轉移至低於 -130°C 的溫度下，最好在液態氮中儲存，直到準備使用。
- 為確保最佳的細胞活力，請在收到後儘快解凍試管並開始培養。如果需要繼續儲存，試管應儲存在 -130°C 以下或液態氮中。請勿儲存在 -70°C，因為這會導致細胞喪失活性。
細胞解凍 (Thawing)
- 將細胞放入 37°C 水浴中快速解凍，同時輕輕攪拌（最多 2 分鐘）。瓶蓋應保持在水面以上，以降低污染風險。
- 用 70% 酒精噴灑並擦拭試管外部，進行消毒。此後，所有操作應在生物安全櫃內無菌條件下進行。
- 將細胞懸浮液移至 15ml 無菌離心管中（內含 5ml 預熱的完全培養基）。以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸去上清液，不要攪動細胞沉澱物。將細胞沉澱物重新懸浮於預熱的完全培養基中，並分裝至 T25 培養瓶中。
- 在建議的條件下培養細胞。
細胞生長條件
- 培養貼附型細胞時，建議搭配使用 PriCoat™ T25 細胞培養瓶 (G299) 或 Applied 細胞外基質(第一型膠原蛋白) (G422)。
- PriGrow IV 培養基 (TM004) + 2 mM L-Glutamine (G275) + 10% 活性碳處理的胎牛血清 (charcoal-stripped FBS) + 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (Penicillin/Streptomycin Solution) (G255)，37.0°C，5% CO₂。
細胞繼代培養 (Subculture)
以下體積適用於 T75 細胞培養瓶，請依培養容器大小按比例增減體積。當細胞覆蓋率達到 80% 滿度時，即可進行繼代培養。
- 吸出培養基，並在培養容器中加入 2-3ml 預熱的 0.25% Trypsin-EDTA 胰蛋白酶 (TM050)。
- 在顯微鏡下觀察細胞是否自附著表面脫落分離（通常需要 2-10 分鐘）。對於難以脫離的細胞，可置於 37°C 下，靜置幾分鐘以促進脫離。
- 將等體積的完全培養基加入培養容器中，以中和 Trypsin-EDTA 胰蛋白酶。
- 將培養懸浮液轉移至無菌離心管中，125xg 離心 5 分鐘。實際離心時間和轉速可能因細胞類型而異。
- 吸出上清液，用預熱的新鮮完全培養基重新懸浮細胞沉澱物。根據需要，將適量的細胞懸浮液加入新的培養容器中。
- 在建議的條件下培養細胞。
細胞冷凍保存 (Cryopreservation)
使用細胞冷凍液 (TM024)，或含 10% DMSO 的完全培養基
細胞接種密度
10,000 – 20,000 cells/cm²
稀釋比例 (Split ratio)
1:3 至 1:6
細胞倍增時間
32 – 42 小時
表現
- IGFBP-1、PRL、TF 和 PAI-1（在蛻膜化終點）
- 嘌呤黴素抗藥性基因 (Puromycin-resistance)
STR 分析
- D5S818 : 8,8
- D13S317 : 12,13
- D7S820 : 10,10
- D16S539 : 12,14
- VWA : 16,18
- TH01 : 7,8
- AMEL : X,X
- TPOX : 9,11
- CSF1PO : 10,12
- D12S391 : 18,20
- FGA : 20,21
- D2S1338 : 17,17
- D21S11 : 30,31.2
- D18S51 : 15,16
- D8S1179 : 14,16
- D3S1358 : 16,17
- D6S1043 : 11,17
- PENTAE : 5,7
- D19S433 : 13,14
- PENTAD : 10,11
- D1S1656 : 13,14