永生化人類心臟微血管內皮細胞 – SV40
Immortalized Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells – SV40
廠牌
產品簡介
本細胞株經測試驗證表現有 CD31、vWF、VE-Cadherin 和 Podoplanin (PDPN) 基因，並具備 Dil-Ac-LDL uptake 功能。
注意事項
僅供研究使用，不適用於診斷或治療用途
細胞型態
貼附性、多邊形 (Adherent, polygonal)
來源組織
血管
物種
人類
捐贈者資訊
男，35歲，白種人
產品開箱和儲存說明
- 收到貨品時，請先目視檢查包裝容器是否有洩漏或破損的跡象。確認包裝容器完整後，立即將細胞轉移至低於 -130°C 的溫度下，最好在液態氮中儲存，直到準備使用。
- 為確保最佳的細胞活力，請在收到後儘快解凍試管並開始培養。如果需要繼續儲存，試管應儲存在 -130°C 以下或液態氮中。請勿儲存在 -70°C，因為這會導致細胞喪失活性。
細胞解凍 (Thawing)
- 將細胞放入 37°C 水浴中快速解凍，同時輕輕攪拌（最多 2 分鐘）。瓶蓋應保持在水面以上，以降低污染風險。
- 用 70% 酒精噴灑並擦拭試管外部，進行消毒。此後，所有操作應在生物安全櫃內無菌條件下進行。
- 將細胞懸浮液移至 15ml 無菌離心管中（內含 5ml 預熱的完全培養基）。以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸去上清液，不要攪動細胞沉澱物。將細胞沉澱物重新懸浮於預熱的完全培養基中，並分裝至 T25 培養瓶中。
- 在建議的條件下培養細胞。
細胞生長條件
- 培養貼附型細胞時，建議搭配使用 PriCoat™ T25 細胞培養瓶 (G299) 或 Applied 細胞外基質(第一型膠原蛋白) (G422)。
- PriGrow I 培養基 (TM001) + 10% FBS（*請勿加熱去活化 heat-inactivate）+ 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (Penicillin/Streptomycin Solution) (G255)，37.0°C，5% CO₂。
細胞繼代培養 (Subculture)
以下體積適用於 T75 細胞培養瓶，請依培養容器大小按比例增減體積。當細胞覆蓋率達到 80% 滿度時，即可進行繼代培養。
- 吸出培養基，並在培養容器中加入 2-3ml 預熱的 0.25% Trypsin-EDTA 胰蛋白酶 (TM050)。
- 在顯微鏡下觀察細胞是否自附著表面脫落分離（通常需要 2-10 分鐘）。對於難以脫離的細胞，可置於 37°C 下，靜置幾分鐘以促進脫離。
- 將等體積的完全培養基加入培養容器中，以中和 Trypsin-EDTA 胰蛋白酶。
- 將培養懸浮液轉移至無菌離心管中，125xg 離心 5 分鐘。實際離心時間和轉速可能因細胞類型而異。
- 吸出上清液，用預熱的新鮮完全培養基重新懸浮細胞沉澱物。根據需要，將適量的細胞懸浮液加入新的培養容器中。
- 在建議的條件下培養細胞。
細胞冷凍保存 (Cryopreservation)
使用細胞冷凍液 (TM024)，或含 10% DMSO 的完全培養基
細胞接種密度
10,000 – 20,000 cells/cm²
細胞倍增時間
120 – 144 小時
細胞永生化方法
使用攜帶 SV40 T 基因的慢病毒進行連續傳代和轉導
STR 分析
- D5S818 : 12,12
- D13S317 : 9,12
- D7S820 : 9,9
- D16S539 : 9,11
- VWA : 17,18
- TH01 : 6,9
- AMEL : X,Y
- TPOX : 8,8
- CSF1PO : 10,10
- D12S391 : 18,25
- FGA : 23,25
- D2S1338 : 20,23
- D21S11 : 31,31.2
- D18S51 : 12,16
- D8S1179 : 13,13
- D3S1358 : 15,18
- D6S1043 : 12,18
- PENTAE : 7,15
- D19S433 : 12,14
- PENTAD : 9,11
- D1S1656 : 16,17.3